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異硫氰酸熒光素FITC修飾荔枝AV污在线观看簡介

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異硫氰酸熒光素FITC修飾荔枝AV污在线观看簡介

發布日期:2021-03-10 作者:荔枝视频APP黄在线观看肽業 點擊:

FITC熒光標記荔枝AV污在线观看屬於FRET肽(Fluorescence resonance energy transfer, FRET)其中一種。FRET肽是研究肽酶特異性的便利工具,其反應過程容易連續監測,為酶活性的檢測提供了一個便捷的方法。FRET肽生物學應用於:

  1. 新的蛋白水解酶的篩選和檢測。

  2. 肽酶、蛋白酶、激酶、磷酸酶的動力特征和功能特征。

  3. 荔枝AV污在线观看折疊的構象研究。

FITC熒光標記應用廣泛,為黃色結晶,zui大吸收光波長為490~495nm,zui大發射光波長520~530nm,可呈現明亮的黃綠色熒光。FITC分子中含有異硫氰基與羧基熒光素相比更具活性,在堿性(pH9.0~9.5)條件下能與肽類或者蛋白的自由氨基結合,形成FITC-荔枝AV污在线观看/蛋白結合物,從而製成熒光荔枝AV污在线观看/蛋白。

在固相荔枝AV污在线观看合成過程中,FITC可以與含有側鏈氨基的賴氨酸(Lys)、鳥氨酸(ornithine),或合成過程中的荔枝AV污在线观看N端氨基反應。當在N端標記時,建議在zui後一個氨基和FITC與氨基反應產生的硫脲鍵之間引入烷基間隔器(alkyl spacer),如氨基己酸(Ahx/Acp)。荔枝AV污在线观看兩種固相荔枝AV污在线观看合成方法(Fmoc和Boc策略合成法)zui終脫離樹脂程序,都要用到強酸TFA乃至更強的HF酸。如不引入氨基己酸(Ahx/Acp),氨基硫甲酰結構在強酸TFA中,極易進攻N末端*荔枝视频黄下载的酰胺鍵,形成五元雜環(乙內酰硫脲衍生物),從荔枝AV污在线观看或者蛋白上脫落。在TFA/H2O體係中乙內酰硫脲衍生物進一步形成結構穩定的乙內酰硫荔枝视频黄下载。從而連同zui後一個荔枝视频黄下载從荔枝AV污在线观看或者蛋白上脫落。








引入氨基己酸(Ahx/Acp),可以有效的保護FITC熒光標記荔枝AV污在线观看的穩定性,保證後續試驗的穩定。

 


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