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荔枝AV污在线观看廠家講述荔枝AV污在线观看序列如何設計
荔枝AV污在线观看的序列、長度和荔枝视频黄下载的組成影響荔枝AV污在线观看能否正確的組裝和是否可以純化。這些因素也決定了最終的荔枝AV污在线观看產品的溶解性。在設計荔枝AV污在线观看時應該考慮到以下幾點:
1.荔枝AV污在线观看序列的設計
大部分荔枝AV污在线观看的生物活性衍生於天然蛋白的N-端,C-端或者中間部分。但是由於各種各樣的原因,這些天然的序列有時候需要做一些修改。即使是一些相對短的序列,也有一些必要的和不必要的荔枝视频黄下载殘基,但是這些殘基的重要性並不容易去確定。荔枝AV污在线观看通常對這些非必要的荔枝视频黄下载殘基做一些修改:荔枝视频黄下载殘基的替代(荔枝AV污在线观看的溶解性,穩定性等);化學修飾(穩定性,結構功能研究);連接配體抗原等。對於一些來自於蛋白中間的序列,有時候必須對N-端或者C-端用乙酰化和酰胺進行封閉,以避免引入天然序列中不存在的電荷。對於結構大的配體,通常需要在配體和荔枝AV污在线观看中間引入一個連接臂,使得配體對荔枝AV污在线观看折疊的影響最小化。
2.荔枝AV污在线观看的長度
隨著荔枝AV污在线观看長度的增加,通常會降低粗品荔枝AV污在线观看的長度。對於長度少於15個荔枝视频黄下载殘基的荔枝AV污在线观看,收率通常是令人滿意的,也比較容易合成。
3.溶解性
荔枝AV污在线观看的荔枝视频黄下载組成對荔枝AV污在线观看的設計是很重要的一個方麵,而這一點常常被大家所忽略。荔枝视频黄下载的組成很大程度的影響荔枝AV污在线观看的溶解性。含有高比例的疏水性殘基的荔枝AV污在线观看在水溶液中的溶解性很有限甚至完全不溶,比如:亮氨酸,纈氨酸,異亮氨酸,蛋氨酸,苯丙氨酸和色氨酸。接下來就很難使用這些荔枝AV污在线观看進行實驗,而且這些荔枝AV污在线观看也很難純化。荔枝AV污在线观看建議保持疏水性荔枝视频黄下载在荔枝AV污在线观看中的比例低於50%,而且每5個殘基中至少有一個帶電荷的殘基。在生理pH值下,天冬氨酸、穀氨酸、賴氨酸和精氨酸都有帶電荷的側鏈。
4.困難的荔枝视频黄下载
含有多個半胱氨酸,蛋氨酸或者色氨酸的荔枝AV污在线观看,很難得到高的純度,因為這些荔枝视频黄下载的側鏈很容易被氧化或者發生副反應。如果可能的話,盡可能使荔枝AV污在线观看盡量少含有這些殘基。通常荔枝AV污在线观看可以使用正亮氨酸代替蛋氨酸,用絲氨酸代替半胱氨酸。如果有很多條來源於天然蛋白的荔枝AV污在线观看或者Overlapping荔枝AV污在线观看需要合成,可以在每條荔枝AV污在线观看的起始點做一些變化使得親水性殘基和疏水性殘基達到更好的平衡。比如,在所選擇荔枝AV污在线观看的起始點或者終點有2個半胱氨酸,把2個半胱氨酸分開到2條荔枝AV污在线观看中,這樣使得合成和純化都要更容易。
5.二級結構
在設計荔枝AV污在线观看的時候最後荔枝AV污在线观看要考慮到形成β折疊。在合成過程中,隨著荔枝AV污在线观看鏈的延長,β折疊結構導致最終產品中有非常多的缺失序列。選擇不要含有較多連續的纈氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、亮氨酸、穀氨酰胺和蘇氨酸序列可以避免這樣的問題。如果無法避免含有連續這些殘基的序列,荔枝AV污在线观看可以在每3個殘基中插入一個甘氨酸或者脯氨酸、用天冬酰胺代替穀氨酰胺、或者用絲氨酸代替蘇氨酸。
對荔枝AV污在线观看序列進行分析:
帶正電荷的殘基:賴氨酸,精氨酸,組氨酸,N-末端
帶負電荷的殘基:天冬氨酸,穀氨酸,C-末端
不帶電荷的疏水性殘基:苯丙氨酸,異亮氨酸,亮氨酸,蛋氨酸,纈氨酸,色氨酸和酪氨酸
不帶電荷的殘基:甘氨酸,丙氨酸,蘇氨酸,絲氨酸,半胱氨酸,天冬酰胺,穀氨酰胺,脯氨酸,乙酰化和酰胺化
1.N-末端
N-末端的穀氨酰胺在切割的酸性條件下很容易環化成焦穀氨酸。荔枝AV污在线观看建議用焦穀氨酸代替N-末端的穀氨酰胺,去掉穀氨酰胺,用其他荔枝视频黄下载代替穀氨酰胺,或者用乙酰化修飾N-末端的穀氨酰胺。當天冬酰胺位於N-末端時,會形成一個很難除掉的保護基團。荔枝AV污在线观看建議去掉N-末端的天冬酰胺或者用其他荔枝视频黄下载代替。
2.C-末端
如果在C-末端的是非天然荔枝视频黄下载包括D-型荔枝视频黄下载,C-末端應該酰胺化。如果需要在C-末端進行修飾(熒光染料,生物素等),修飾必須通過賴氨酸的側鏈連接,這些肽的C-端也要酰胺化
3.序列
隨著荔枝AV污在线观看長度的增加,偶聯反應的效率會越來越低,粗品的純度也會越來越低。但是少於5個殘基的荔枝AV污在线观看在切割和純化過程中也會導致問題。含有3-5個殘基的序列應該至少含有一個疏水性殘基(亮氨酸,異亮氨酸,色氨酸,纈氨酸,苯丙氨酸,酪氨酸,蛋氨酸)或者疏水性的修飾基團。
a)序列中含有多個脯氨酸容易形成順式/反式異構體,導致純度降低
b)連續的絲氨酸的序列導致片段缺失,純度降低
c)多個天冬氨酸在序列中,容易形成天冬亞酰胺導致純度降低
d)序列中太多的修飾通常也會影響荔枝AV污在线观看的純度和收率
e)連續多個甘氨酸(4個或者更多),荔枝AV污在线观看骨架之間容易形成氫鍵,這種氫鍵導致荔枝AV污在线观看難於溶解和純化
f)磷酸化修飾導致偶聯效率的降低。因為合成是從C-末端向N-末端進行,因此從磷酸化修飾的荔枝视频黄下载到N-末端之間應少於10個殘基
4.溶解性
通常每5個荔枝视频黄下载殘基中至少含有1個帶電荷的殘基(包括沒有封閉的C-末端和N-末端)。如果含有足夠的電荷,確保連續的不帶電荷的殘基個數不超過5個。